UCA1a(CUDR)基因真核表达载体的构建及其在膀胱癌UM-UC-2细胞中的表达

近日，陕西中医学院医学科研实验中心研究人员发表论文，旨在构建UCA1a(CUDR)基因真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)，观察其在膀胱癌UM-UC-2细胞中的表达。

为研究UCA1a(CUDR)基因与膀胱癌的关系提供实验依据。研究指出，成功构建pcDNA-UCA1a(CUDR)真核表达载体，且UCA1a(CUDR)基因在转染表达载体的UM-UC-2细胞中高表达。该文发表在2014年第03期《吉林大学学报(医学版)》杂志上。

以膀胱癌BLZ-211细胞的5′-RACE-Ready cDNA为模板，采用PCR法克隆UCA1a(CUDR)全基因，经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接，构建pcDNA-UCA1a(CUDR)重组质粒。

双酶切及测序鉴定后，稳定转染至体外培养的人膀胱癌UM-UC-2细胞系，利用RT-PCR法检测转染pcDNA-UCA1a(CUDR)的UM-UC-2细胞和转染空质粒pcDNA3.1(+)的UM-UC-2细胞中UCA1a(CUDR)基因的表达。

克隆的目的基因片段约为2 200bp，与预期结果相符，表明成功扩增UCA1a(CUDR)基因;经双酶切及测序鉴定，成功构建真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)。半定量RT-PCR法检测，与转染空质粒的细胞比较，转染表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)的UM-UC-2细胞中UCA1a(CUDR)基因表达量升高。

（责任编辑：李德亮）