横纹肌肉瘤的分子生物学

1.有关横纹肌肉瘤发生、发展的分子遗传学研究

关于P53肿瘤抑制基因在横纹肌肉瘤中的表现，该肿瘤的大部分被研究的细胞系中有多种因素导致P53发生突变。在一个证实发生横纹肌肉瘤的里一费综合征病例中，该基因作为一个种系突变已被观察并受到重视。然而，在这些发病机制中，P53功能改变是否是主要因素或者这种改变是否与其他的因素有更紧密关系都还不明了。

在横纹肌肉瘤中最常观察到的肿瘤基因异常是ras基因突变，N-ras和K-ras的激活形式已经从横纹肌肉瘤肿瘤细胞种系标本中分离出来。在胚胎型横纹肌肉瘤标本的观察中发现激活的N-ras和K-ras发生率为35%。

肌源性蛋白质的基本螺旋环--Myod蛋白家族的发现，大大增强了对骨骼肌分化的了解，这些蛋白质的作用是通过诱导像肌球蛋和肌酸激酶这样的骨骼肌特异蛋白质转录来激活骨骼肌的终末分化程度。在横纹肌肉瘤中MyoD蛋白家族的表达使儿科肿瘤的分类更精细。

2.有关病理分型与预后判断的分子病理学研究

到目前为止，已经有较多的关于导致横纹肌肉瘤发生、发展的分子遗传学方面的研究报道。在过去的10年里，与这种肿瘤发生、发展相联系的关于分子遗传学改变的研究有很多。横纹肌肉瘤的两个主要的组织学亚型为胚胎型和腺泡型。腺泡型横纹肌肉瘤特症为：在2号染色体长臂和13号染色体长臂之间有易位，符号标记为t(2；13)(q35；q14)，这种易位已被分子克隆。虽然这种肿瘤特异易位的精确结果有待于阐明，但是建立在遗传学基础上的多聚酶链反应(PCR)已经可以确定腺泡型横纹肌肉瘤的诊断。另一个主要的组织亚型是胚胎型横纹肌肉瘤，已经知道其在11P15位点杂合性丧失，而且这种杂合性丧失包括母亲的遗传信息和父亲遗传物质复制在这个位点上丧失。可能是11P15位点上杂合性丧失反映了未被鉴别的肿瘤抑制因子行为的丧失或者IGF-II活性丧失和在胚胎型横纹肌肉瘤中11P15上的11P15肿瘤抑制因子行为的丧失。

特征性的肿瘤基因t(z；B(q35；q14)的异常能被反转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术确定，并为诊断腺泡型横纹肌肉瘤提供明确的证据，用这种方法提取RNA常需要新鲜的冰冻组织，但目前RNA逐渐可从石蜡包埋的标本中获得。在胚胎型横纹肌肉瘤中，11P15位点高度多形性标志的有效性可运用PCR技术快速从11P15石蜡切片中鉴别出杂合性丧失。在横纹肌肉瘤亚型分类中的应用，可能有助于区分在腺泡型和胚胎型肿瘤之间的差异，也有助于解决这些肿瘤的发病机制问题，例如现在还不知道：具有少量腺泡结构的肿瘤在t(2；13)(q35；q14)位上是否全部阳性？是否只有腺泡成份才有这种改变？这些技术的应用最近表明：外胚层间充质具有神经和纹状肌分化的肿瘤与尤文氏肉瘤的关系比其与横纹肌肉瘤的关系更密切。

由于分子技术更广泛的应用，未分化肉瘤的诊断就会逐渐减少。然而，仍有少数肿瘤在组织学上合乎肉瘤的标准，但不表达谱系标志，没有可鉴别的肿瘤特异性遗传学改变，这些肿瘤仍继续称未分化肉瘤。

在关于组织学预后意义和确定组织学亚型重要性方面还有争议。组织学改变可能是一种重要的预后变量，St.Jude儿童研究医院的研究者们对两组15年来患有横纹肌肉瘤的159例进行评估，发现在没有发生转移的病人中，组织学表现是一个很重要的预后因素；胚胎型肿瘤比腺胞型或固体小泡型变种的预后要好。在预后判断中，特别是在胚胎型组织结构的肿瘤预后判断当中，另一个被研究的遗传学异常是DNA内容或倍体的改变。

这已经经流式细胞仪计数测量，许多肿瘤和染色体异常相关的DNA内容有异常变异，胚胎型横纹肌肉瘤DNA内容常表现超倍体异常，是DNA正常数量的1.1-1.8倍。组织学的二倍体异常的预后看起来比超倍体的预后要差，并且这更象是一种独立的预后因素。当前，预期研究DNA内容可以进一步决定预后意义。为什么二倍体DNA预后更差的机理还不明了，但是必须记住二倍体DNA，不意味着正常的染色体组成。

（责任编辑：王巍）